高一生物復習方法：微生物的實驗室培養知識點梳理

　　知識背景：

　　1培養基的種類包括固體培養基和 液體 培養基等。

　　思考1：瓊脂的化學成分是什么？在配制培養基中時的作用是？

　　【補充】培養基的類型及其應用：

　　標準

　　培養基類型

　　配制特點

　　主要應用

　　物理性質

　　固體培養基

　　加入瓊脂較多

　　菌種分離,鑒定,計數

　　半固體培養基

　　加入瓊脂較少

　　菌種保存

　　液體培養基

　　不加入瓊脂

　　工業生產，連續培養

　　化學組成

　　合成培養基

　　由已知成分配制而成，培養基成分明確

　　菌種分類、鑒定

　　天然培養基

　　由天然成分配制而成，培養基成分不明確

　　工業生，產降低成本

　　目的用途

　　鑒別培養基

　　添加某種指示劑或化學藥劑

　　菌種的鑒別

　　選擇培養基

　　添加（或缺少）某種化學成分

　　菌種的分離

　　2培養基的化學成分包括水、 無機鹽 、 碳源 、 氮源 四類營養成分。

　　思考2：從細胞的化學元素組成來看，培養基中為什么都含有這些營養成分?

　　【補充】碳源：如CO2、糖類、脂肪酸等有機物，構成微生物的結構物質和分泌物，并提供能量。

　　氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來合成蛋白質、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。

　　3培養基除滿足微生物生長的pH、 特殊營養物質和氧氣等要求。

　　思考3：牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么營養物質?

　　思考4：培養乳酸桿菌時需要添加 什么物質?

　　培養霉菌和細菌時分別需要怎樣調節pH?

　　【補充】生長因子：某些微生物正常生長代謝過程中必須從培養基中吸收的微量有機小分子，如某些氨基酸、堿基、維生素等。

　　閱讀無菌技術，討論回答下列問題：

　　4獲得純凈培養物的關鍵是什么?

　　5無菌技術包括哪些?

　　6比較消毒和滅菌(填表)

　　比較項

　　理化因素的作用強度

　　消滅微生物的數量

　　芽孢和孢子能否被消滅

　　消毒

　　較為溫和

　　部分生活狀態的微生物

　　不能

　　滅菌

　　強烈

　　全部微生物

　　能

　　思考5：無菌技術除了防止培養物被污染外，還具有的目的是?

　　7消毒方法：

　　(1)日常生活經常用到的是煮沸消毒法;

　　(2)對一些不耐高溫的液體，則使用巴氏消毒法(作簡要介紹);(3)對接種室、接種箱或超凈工作臺首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增強消毒效果，然后使用紫外線進行物理消毒。

　　(4)實驗操作者的雙手使用酒精進行消毒;

　　(5)飲水水源用 氯氣 進行消毒。

　　8滅菌方法：

　　(1)接種環、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;

　　(2)玻璃器皿、金屬用具等使用 干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱;

　　(3)培養基、無菌水等使用 高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸

　　汽滅菌鍋 。

　　(4)表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。

　　思考6：對接種環滅菌時要用酒精燈的哪一個層火焰灼燒可能伸入試管或培養皿的部位?

　　思考7：利用干熱滅菌箱對玻璃器皿滅菌時物品不能擺得太擠，目的是什么?

　　思考8：物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，要首先打開排氣閥，煮沸并排除鍋內冷空氣，其目的是?

　　【補充】培養基的配制原則：

　　①目的要明確

　　②營養要協調

　　③pH要適宜