高一生物教案：《探究影響酶活性的條件》教學設計(3)
來源：網(wǎng)絡整理 2018-11-24 19:49:51
第二課時
實驗設計
1．1 選用過氧化氫酶作為實驗探究對象: 過氧化氫是細胞中某些化學反應的副產(chǎn)物，具有強氧化性，如果不及時除去或分解，就會殺死細胞。在動物的肝細胞和血細胞中含有較多的過氧化氫酶，它可以促進過氧化氫分解。由于過氧化氫酶容易獲得且催化反應的現(xiàn)象明顯，所以選用過氧化氫酶作為實驗探究對象。
1．2 設備準備: 實驗用具有：試管四支(帶有單孔膠塞，在膠塞上另穿一細銅絲，銅絲的下端彎曲成水平的雙圓環(huán)形成一個自制的反應匙，反應匙上可放浸有H2O2酶的濾紙片，利用銅絲的上下活動控制反應時間。)、移液管、鑷子、水槽、10 mL量筒、25 mL量筒等；反應物為30％H2O2。
實驗中需要制作 H2O2酶濾紙片，制作方法是：將 10 g鮮肝剪碎，置于研缽中充分研磨，加入200 mL蒸餾水制成鮮肝液。然后，將5張濾紙疊加剪成5張大小相同面積大2 cm2的小片，平展在表面皿中，用鮮肝液浸泡l min后使用。
配制緩沖液：將17.96 g Na2HPO4·7H2O在 1 000 mL容量瓶內(nèi)溶于蒸餾水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L Na2HPO4溶液。將9.07 g KH2PO4在1 000 mL容量瓶內(nèi)溶于蒸餾水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L KH2PO4溶液。然后按下表用上述兩種溶液配制pH=5、pH=6、pH=7、pH=8緩沖液.
|
pH |
5 |
6 |
7 |
8 |
|
物質(zhì)的量濃度為0.067 mol/L的Na2HPO4溶液(mL) |
1 |
20 |
60 |
95 |
|
物質(zhì)的量濃度為0.067 mol/L的K2HPO4溶液（mL） |
99 |
80 |
40 |
5 |
1．3 實驗步驟: 在多方查閱資料和師生共同實踐探索我們設計出現(xiàn)有實驗裝置(如右圖)，該裝置左側(cè)的試管用來完成酶催化H2O2 的分解反應，右側(cè)的量筒用來計量排水后收集的氧氣的量。在此基礎(chǔ)上制定出簡單易行的且效果好的實驗步驟如下：
l）向水槽中加水至將滿為止；
2）將大小相同的5片濾紙片在鮮肝液中浸泡l min，然后用鑷子夾起濾紙片，靠在培養(yǎng)皿壁上，使多余的酶液流盡；
3）用5mL量筒向試管中加入 pH＝5的緩沖液 2 mL，然后再用移液管加入 2 mL 30％的H2O2溶液，用鑷子將1片酶濾紙片小心地放在用銅絲自制的反應匙上。注意濾紙片不要碰到反應試管壁，將軟膠塞塞緊試管口；
4）將25 mL量筒橫放于水槽中使之灌滿水，若有氣泡，將其輕輕傾斜，小心趕出氣泡。將量筒倒立，使筒口一直處于水中；
5）將自制銅絲反應匙下降到試管內(nèi)液面下，使H2O2溶液接觸酶濾紙片。同時開始計時，在 30 S時，用鋼絲莢導氣皮管，將導氣管從量筒中拿出，松開鋼絲莢，讀取量筒水平面刻度并作出標記后記錄。
6）取新的干凈試管，重復上述實驗過程，測量在 pH=6、pH=7、pH=8時過氧化氫在酶的催化下所釋放的氣體量。(注意：所有的實驗中都要嚴格保證干凈，不應該有上一次反應后的剩余溶液，每次試驗完后，應充分沖洗量取緩沖液的量筒、自制反應匙(至少三次)，然后用相應的緩沖液再沖洗一遍。量取H2O2溶液的移液管不用洗)
1.4 實驗結(jié)果記錄表：
|
結(jié)果記錄 |
第1次PH=5 |
第2次PH=6 |
第3次PH=7 |
第4次PH=8 |
|
釋放氧氣量(ML) |
2、播放實驗演示錄像，讓學生了解實驗探究的過程。
3、學生開始實驗，教師給予巡回指導。
4、實驗結(jié)果的討論和分析推論
請各組同學選派一代表將本小組所得的實驗數(shù)據(jù)寫在黑板上的表格中，我們對全體實驗小組的實驗數(shù)據(jù)進行分析又會得到什么樣的推論？ 我們自己小組的實驗結(jié)果與全班同學實驗數(shù)據(jù)推導出的結(jié)論是否一致？你能否說出其中的原因？
5、課后思考題
1）我們所設計的實驗原理和目的是什么？實驗的自變量和因變量是什么？
2）能否根據(jù)你所記錄的實驗數(shù)據(jù)得到pH與酶的催化效率關(guān)系的變化曲線？你所繪出的曲線與課本上的有何不同？試說明理由。
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